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Edinburgh荧光光度计 荧光光度计 泰科施普

发布日期 :2022-11-27 11:36发布IP:123.58.44.124编号:11052078
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荧光光谱定量分析


在低浓度时,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度成正比:F=Kc。其中,Edinburgh荧光光度计报价,F为荧光强度,c为荧光物质浓度,K为比例系数。这就是荧光光谱定量分析的依据。

上述关系不适用于荧光物质浓度过高时,荧光物质浓度过高,其荧光强度反而降低。原因有:

(1)内滤效应。一是,荧光光度计报价,当溶液浓度过高时,溶液中杂质对入射光的吸收作用增大,相当于降低了激发光的强度。二是,浓度过高时,入射光被液池前部的荧光物质强烈吸收,处于液池中、后部的荧光物质,则因受到入射光大大减弱而使荧光强度大大降低;而仪器的探测窗口通常对准液池中部,从而导致检测到的荧光强度大大降低。

(2)相互作用。较高浓度溶液中,可发生溶质间的相互作用,产生荧光物质的激发态分子与其基态分子的二聚物或其他溶质分子的复合物,Techcomp荧光光度计报价,从而导致荧光光谱的改变和/或荧光强度下降。当浓度更大时,甚至会形成荧光物质的基态分子聚集体,导致荧光强度更严重下降。

(3)自淬灭。荧光物质的发射光谱与其吸收光谱呈现重叠,便可能发生所发射的荧光被部分再吸收的现象,导致荧光强度下降。溶液浓度增大时会促使再吸收现象加剧。

当然,荧光强度的影响因素还有溶剂、温度、pH值、散射光等,在定量分析中需要加以考虑。

荧光光谱定量分析的计算与其他光谱类似,包括标准曲线法、比例法等。









荧光光谱


什么是荧光光谱?

任何荧光化合物都具有两个特征光谱:激发光谱和发射光谱。激发光谱反映了某一固定的发射波长下所测量的荧光强度对激发波长的依赖关系;发射光谱反映了某一固定激发波长下所测量的荧光的波长分布。

荧光光谱能够提供激发谱、发射谱、峰位、峰强度、产率、荧光寿命、荧光偏振度等信息,荧光分析定性和定量的基础。

荧光光谱的特点:(1)Stokes位移。激发光谱与发射光谱之间有波长差,发射光谱波长比激发光谱波长长;(2)发射光谱的形状与激发波长无关;(3)镜像规则,荧光发射光谱与它的吸收光谱成镜像对称关系。






荧光分光光度计的构成

1. 光源:为氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用。

2.激发单色器:置于光源和样品室之间的为激发单色器或一单色器,筛选出特定的激发光谱。

3.发射单色器:置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

4. 样品室:通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。

5. 检测器:一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。



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