荧光分光光度计测试注意事项
①样品应盛在四面透光的石英比色皿(荧光池)中,如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。
②在荧光分析时,为了得到稳定且可靠的数据,荧光光谱仪代理商,一般需要开机预热氙灯大约30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯,预热时间可以缩短到10min左右。对某些易感光、易分解的荧光物质,尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。
③温度变化可引起荧光强度的改变。通常降低温度,有利于提高荧光量的子产率,荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异,大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大,爱丁堡荧光光谱仪代理商,测试温度变化不超过±3℃,对测试结果几乎无影响。
④当荧光物质是弱酸或弱碱时,Edinburgh荧光光谱仪代理商,溶液的pH对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中,分子和离子的电离平衡会发生改变,而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。
⑤分子结构中存在π-π共轭的荧光物质在极性溶剂中,荧光效率显著增强。溶液中表面活性剂的加入能够显著提高荧光强度。
⑥瑞利散射和拉曼散射是溶剂的两种散射光,应注意不要误把瑞利散射和拉曼散射光谱当做荧光光谱。瑞利散射光波长与激发光波长相同,拉曼散射与激发光波长不同,而荧光物质的荧光波长与激发光波长无关,因此可以通过选择适当的激发波长将拉曼散射光与荧光分开。在测试时选择合适的狭缝宽度,或者空白扣除,也可以对散射光的影响进行校正。
⑦荧光物质分子与溶液中其它物质分子之间作用导致荧光强度降低,常见的荧光猝灭剂,如卤素离子、重金属离子、硝基化物质、重氮化合物等。
⑧测试过程中注意不要肉眼盯着氙灯光源看,以防眼睛造成损伤。
⑨仪器房应注意经常通风,避免产生的臭氧在室内富集。
荧光光谱的分类
原子荧光可分为 3类:即共振荧光、非共振荧光和敏化荧光,其中以共振原子荧光,在分析中应用。共振荧光是所发射的荧光和吸收的辐射波长相同。只有当基态是单一态,不存在中间能级,才能产生共振荧光。非共振荧光是激发态原子发射的荧光波长和吸收的辐射波长不相同。非共振荧光又可分为直跃线荧光、阶跃线荧光和反斯托克斯荧光。直跃线荧光是激发态原子由高能级跃迁到高于基态的亚稳能级所产生的荧光。阶跃线荧光是激发态原子先以非辐射方式去活化损失部分能量,回到较低的激发态,再以辐射方式去活化跃迁到基态所发射的荧光。直跃线和阶跃线荧光的波长都是比吸收辐射的波长要长。反斯托克斯荧光的特点是荧光波长比吸收光辐射的波长要短。敏化原子荧光是激发态原子通过碰撞将激发能转移给另一个原子使其激发,Techcomp荧光光谱仪代理商,后者再以辐射方式去活化而发射的荧光。
荧光光谱仪
荧光光谱仪又称荧光分光光度计,是一种定性、定量分析的仪器。通过荧光光谱仪的检测,可以获得物质的激发光谱、发射光谱、产率、荧光强度、荧光寿命、斯托克斯位移、荧光偏振与去偏振特性,以及荧光的淬灭方面的信息。由光源、激发光源、发射光源、试样池、检测器、显示装置等组成。荧光光谱仪可分为X射线荧光光谱仪和分子荧光光谱仪。
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